Le blocage de CTLA-4 agit principalement au stade de l'amorçage des cellules T dans les ganglions lymphatiques, empêchant CTLA-4 d'inhiber compétitivement CD28 pour la liaison aux ligands B7, ce qui potentialise l'activation des cellules T. Le blocage de PD-1 agit dans le microenvironnement tumoral, empêchant l'épuisement des cellules T effectrices médié par PD-L1/PD-L2. Les deux mécanismes sont complémentaires, ce qui explique pourquoi la thérapie combinée CTLA-4 + PD-1 (Ipilimumab + Nivolumab) montre une efficacité clinique synergique dans de multiples types tumoraux.

Pour les essais de blocage, la CTLA-4-Fc chimère est recommandée car le domaine Fc fournit une liaison bivalente qui imite l'avidité de l'homodimère natif de CTLA-4. Combinez-la avec des protéines recombinantes CD80 ou CD86 pour mettre en place des essais de liaison compétitive ou de gène rapporteur. Pour les cinétiques SPR nécessitant une affinité monovalente, utilisez le ECD CTLA-4 His-tagged.

Oui. Nous proposons un biosimilaire d'Ipilimumab de grade recherche (anti-CTLA-4 humain, sous-classe IgG1) produit en cellules CHO. Il convient comme contrôle positif dans les essais de liaison à CTLA-4, standard de référence pour le développement de méthodes bioanalytiques et les études de comparabilité analytique. Réservé à l'usage RUO, non destiné à un usage thérapeutique.

Oui. CTLA-4 est exprimé de manière constitutive dans les compartiments intracellulaires des Treg et n'est exprimé que transitoirement à la surface cellulaire après activation. Pour la coloration intracellulaire, fixez et perméabilisez d'abord les cellules, puis colorez avec un anticorps anti-CTLA-4 conjugué à un fluorochrome. Pour la coloration de surface des cellules T activées, stimulez avec anti-CD3/CD28 pendant 24-48 heures avant la coloration.

Un essai typique co-cultive des cellules rapportrices Jurkat-NFAT-Luc exprimant CTLA-4 avec des cellules CHO présentatrices d'antigène exprimant CD80. La liaison de CTLA-4 supprime le signal luciférase dirigé par NFAT ; l'ajout d'un anticorps bloquant anti-CTLA-4 lève la suppression, générant une augmentation dose-dépendante de la luminescence. Utilisez la protéine recombinante CTLA-4 comme calibrateur et le biosimilaire d'Ipilimumab comme contrôle positif.