El bloqueo de CTLA-4 actúa principalmente en la fase de cebado de células T en los ganglios linfáticos, impidiendo que CTLA-4 inhiba competitivamente a CD28 por la unión a ligandos B7, lo que potencia la activación de células T. El bloqueo de PD-1 actúa en el microambiente tumoral, previniendo el agotamiento de células T efectoras mediado por PD-L1/PD-L2. Ambos mecanismos son complementarios, lo que explica por qué la terapia combinada CTLA-4 + PD-1 (Ipilimumab + Nivolumab) muestra eficacia clínica sinérgica en múltiples tipos tumorales.

Para ensayos de bloqueo, se recomienda CTLA-4-Fc quimérica, ya que el dominio Fc proporciona unión bivalente que imita la avidez del homodímero nativo de CTLA-4. Combínela con proteínas recombinantes CD80 o CD86 para configurar ensayos de unión competitiva o de gen reportero. Para cinéticas SPR donde se necesita afinidad monovalente, use CTLA-4 ECD His-tagged.

Sí. Ofrecemos un biosimilar de Ipilimumab de grado investigación (anti-CTLA-4 humano, subclase IgG1) producido en células CHO. Es adecuado como control positivo en ensayos de unión a CTLA-4, estándar de referencia en el desarrollo de métodos bioanalíticos y estudios de comparabilidad analítica. Solo para RUO y no para uso terapéutico.

Sí. CTLA-4 se expresa constitutivamente en compartimentos intracelulares de Treg y solo se expresa transitoriamente en la superficie celular tras la activación. Para tinción intracelular, primero fije y permeabilice las células, luego tiña con anticuerpo anti-CTLA-4 conjugado con fluorocromo. Para tinción superficial de células T activadas, estimule con anti-CD3/CD28 durante 24-48 horas antes de la tinción.

Un ensayo típico co-cultiva células reporteras Jurkat-NFAT-Luc que expresan CTLA-4 con células CHO presentadoras de antígeno que expresan CD80. La unión de CTLA-4 suprime la señal de luciferasa dirigida por NFAT; al añadir un anticuerpo bloqueante anti-CTLA-4, se libera la supresión generando un aumento de luminiscencia dosis-dependiente. Use proteína recombinante CTLA-4 como calibrador y biosimilar de Ipilimumab como control positivo.