Антитела, белки и наборы ELISA CD3/CD3E | Терапевтические мишени

CD3 (CD3E / CD3 epsilon) — центральный компонент сигнального комплекса Т-клеточного рецептора (TCR) и один из наиболее широко используемых маркеров для идентификации Т-клеток. Являясь универсальным связывающим плечом для биспецифических Т-клеточных энгейджеров (BiTE), CAR-T-конструктов и Т-клеточных перенаправляющих иммунотерапий, реагенты CD3 незаменимы как в фундаментальной иммунологии, так и в разработке терапевтических антител. abinScience предлагает комплексный портфель CD3, включающий рекомбинантные белки CD3, моноклональные антитела к CD3, стандарты биоаналогов и наборы ELISA.

Биология и значение CD3

Комплекс CD3 состоит из четырёх субъединиц — CD3 epsilon (CD3E), CD3 delta, CD3 gamma и CD3 zeta — которые ассоциируются с гетеродимером TCR альфа/бета, образуя полный комплекс TCR-CD3. CD3E является наиболее терапевтически значимой субъединицей, поскольку экспонирована на поверхности Т-клеток и служит основным сайтом стыковки для биспецифических антител, активирующих Т-клетки.

При распознавании антигена комплекс CD3 передаёт активационные сигналы через внутриклеточные тирозиновые активационные мотивы иммунорецепторов (ITAM), запуская пролиферацию Т-клеток, высвобождение цитокинов и цитотоксическую активность. Эта центральная роль в активации Т-клеток делает CD3 ключевой мишенью в иммуноонкологии, трансплантационной иммунологии и исследованиях аутоиммунных заболеваний.

Основные области исследований

Разработка биспецифических антител Рекомбинантные белки CD3E (His-tagged, Fc-химера, биотинилированные) в качестве антигена Т-клеточного плеча для скрининга биспецифических антител, кинетики связывания SPR/BLI и мостикового ELISA для молекул класса BiTE.

Активация Т-клеток и функциональные анализы Антитела к CD3 (например, биоаналог OKT3) для стимуляции пролиферации Т-клеток, секреции цитокинов (IL-2, IFN-γ) и цитотоксичности в клеточных функциональных анализах и смешанных лимфоцитарных реакциях.

Проточная цитометрия и иммунофенотипирование Флуорохром-конъюгированные антитела к CD3 (FITC, PE, APC) в качестве пан-Т-клеточных маркеров в многоцветных панелях проточной цитометрии для профилирования иммунных клеток и клинического иммунофенотипирования.

Разработка анализов PK/ADA Подобранные пары антител к CD3 и калибраторные белки CD3E для сэндвич-ELISA фармакокинетики и антител к лекарственному средству в доклинических и клинических программах CD3-направленных терапий.

Руководство по выбору продуктов CD3

Применение	Рекомендуемый продукт	Формат
Кинетика связывания SPR/BLI	Рекомбинантный белок CD3E	Avi-tagged или биотинилированный
Мостиковый ELISA биспецифических антител	Рекомбинантный белок CD3E	His-tagged или Fc-химера
Активация / пролиферация Т-клеток	Антитело к CD3 (клон OKT3)	Неконъюгированное, низкий эндотоксин
Проточная цитометрия / FACS	Антитело к CD3	Конъюгаты FITC, PE, APC или PerCP
Детекция WB / ИГХ	Поликлональное или моноклональное антитело к CD3E	Неконъюгированное
PK/ADA ELISA	Подобранная пара антител + калибратор	Пара захват/детекция
Аналитическая сопоставимость / референс	Биоаналог анти-CD3 (аналог Муромонаба)	Research-grade RUO

Часто задаваемые вопросы о CD3

В чём разница между CD3E, CD3D, CD3G и CD3Z?

CD3 epsilon (CD3E) и CD3 delta (CD3D) образуют один гетеродимер, а CD3 epsilon и CD3 gamma (CD3G) — другой. CD3 zeta (CD3Z / CD247) образует гомодимер и содержит основные сигнальные ITAM. В разработке биспецифических антител и для активации Т-клеток CD3E является наиболее часто используемой субъединицей-мишенью, поскольку она экспонирована на поверхности и доступна для связывания антител.

Какой формат белка CD3 использовать для скрининга биспецифических антител?

Для кинетики связывания SPR/BLI используйте Avi-tagged или биотинилированный белок CD3E для ориентированной иммобилизации на поверхностях, покрытых стрептавидином. Для мостикового ELISA рекомендуется His-tagged CD3E для покрытия Ni-NTA планшетов. Для клеточных анализов связывания рассмотрите использование стабильных клеточных линий, экспрессирующих CD3.

Можно ли использовать ваше антитело к CD3 для активации Т-клеток в функциональных анализах?

Да. Наши антитела к CD3 (клон OKT3 и другие валидированные клоны) могут использоваться для стимуляции Т-клеток в твёрдой фазе или в растворе. Для анализов активации Т-клеток мы рекомендуем использовать анти-CD3 в сочетании с ко-стимуляцией анти-CD28 для оптимальной пролиферации и продукции цитокинов.

Предлагаете ли вы белки CD3 с перекрёстной реактивностью к человеку и мыши/яванскому макаку?

Да. Мы предлагаем рекомбинантные белки CD3E человека, мыши и яванского макака. Межвидовые белки CD3 необходимы для доклинической разработки биспецифических антител, обеспечивая оценку связывания между видами, используемыми в токсикологических исследованиях. Проверьте доступность по видам и данные о перекрёстной реактивности на страницах отдельных продуктов.

Какой клон использовать для окрашивания Т-клеток в проточной цитометрии?

OKT3 и UCHT1 — наиболее цитируемые клоны антител к CD3 человека для проточной цитометрии. Оба распознают CD3 epsilon и доступны в нескольких конъюгатах с флуорохромами (FITC, PE, APC, PerCP). OKT3 также широко используется в анализах активации Т-клеток. Выбирайте конъюгат в соответствии с дизайном панели и лазерной конфигурацией вашего прибора.